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                      RNA提取服務

                      RNA提取服務

                      貨    號: HS-MS002

                      產品規格: /樣

                      價    格:--

                      周    期:

                      產品介紹

                      一、服務簡介

                            從細胞中提取基因組DNA和總RNA后,仍混雜著蛋白質、多糖和各種大小分子核酸同類物。除去這些“雜質”的過程,也就是核酸提純過程。在核酸的分離純化時,為防止核酸大分子的變性降解,必須在0~4℃的低溫條件下操作。核酸酶的水解作用,是過去制備具有活性核酸大分子的嚴重障礙,現普遍采用加入去污劑或加入EDTA、8-羥基喹啉、檸檬酸鈉以除去核酸酶的激活劑Mg2+,就可以抑制核酸酶的活性,保證在提純過程中核酸大分子的完整。   

                            TRIZOL試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯,仿時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。


                      二、技術流程

                      RNA提?。═rizol提?。嶒灢襟E

                      在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時,將存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase的作用。

                       1. 提取組織RNA 時,每50~100mg 組織用1ml Trizol試劑對組織進行裂解;提取細胞RNA 時,先離心沉淀細胞,每5-10 ╳106 個細胞加1ml Trizol后,反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞;

                       2. 將上述組織或細胞的Trizol裂解液轉入EP 管中,在室溫15~30C下放置5 分鐘

                       3. 在上述EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 氯, 仿的量加入氯, 仿,蓋上EP管蓋子,在手中用力震蕩15 秒,在室溫下(15℃~30℃)放置2~3 分鐘后,12000g(2℃~8℃)離心15 分鐘;

                       4. 取上層水相置于新EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 異丙醇的量加入異丙醇,在室溫下(15℃~30℃)放置10 分鐘,12000g(2℃~8℃)離心10 分鐘

                       5. 棄上清,按照每1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇進行洗滌,渦旋混合,7500g(2℃~8℃)離心5 分鐘,棄上清;

                       6. 讓沉淀的RNA 在室溫下自然干燥;

                       7.用Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。


                      三、服務說明

                       1、客戶提供:待提取的細胞或組織;

                       2、RNA提取物,及測定濃度數據。


                      四、成果展示


                      五、詢價及訂購

                      感謝您選擇我公司的RNA提取服務。如有相關問題請聯系我們的工作人員。



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